Kuidas teha fosfaatpuhvrit

Neid puhvreid saab kasutada bioloogilisel otstarbel peaaegu neutraalse pH-ga

Mis muudab fosfaatpuhvrid silma paista? Esiteks, kuna see sisaldab kolme happelist prootonit, on fosforhappel mitu dissotsiatsioonikonstandit ja seda saab kasutada puhvrite tekitamiseks mõlema kolme vastava pH-ga.

Kolme pKa väärtused fosforhappe kohta (CRC keemia- ja füüsikakäsiraamatus) on 2,16, 7,21 ja 12,32. Mononaatriumfosfaadi ja selle konjugaadi aluse dinaatriumfosfaati kasutatakse tavaliselt pH väärtuste puhvrite tekitamiseks umbes 7-des bioloogiliseks kasutamiseks, nagu siin on näidatud.

Selle puhvri tegemine on natuke raskem kui TAE ja TBE puhvrite tegemine. Kuid see pole eriti raske. Lihtsalt keskmine. Selle puhvri hõõrumine peaks võtma umbes 10 minutit. Siin on kuidas.

1. Otsustage puhvri omadused

Enne puhvri tegemist peate esmalt teadma, milline molaarsus soovid seda teha, millist mahtu teha ja milline on soovitud pH. Enamik puhvreid toimivad kõige paremini kontsentratsioonidel 0,1 M kuni 10 M. PH peaks olema happe / konjugaadi aluse pKa 1 pH ühikutes. Lihtsuse huvides on selle valimi arvutus 1 liitri puhvri jaoks.

2. Määratlege happe suhe baasi

Kasutage Hendersoni-Hasselbalchi võrrandit (allpool), et määrata, milline happe ja aluse suhe on vajalik, et saada soovitud pH puhver. Kasutage pKa väärtust, mis on lähemal soovitud pH-st, ja suhe viitab sellele pKa-le vastavale happe-aluse konjugaadi paarile.

HH võrrand: pH = pKa + log ([alus] / [hape])

PH puhvriga 6,9, [alus] / [hape] = 0,4889

[Happe] ja [Base] jaoks lahendus

Puhver soovitud molaarsus on [Acid] + [Base] summa.

1 M puhvri puhul [Base] + [Hape] = 1 ja [Base] = 1 - [Hape]

Asendades selle suhtevõrrandiga, alates sammusest 2 saad:

[Hape] = 0,6712 mooli / L

Lahendus [happega]

Kasutades võrrandit: [Base] = 1 - [hape], võite arvutada, et:

[Base] = 0,3288 mooli / L

3. Segage happe ja konjugaadi alus

Kui olete kasutanud Hendersoni-Hasselbalchi võrrandit, et arvutada, milline suhkru sisaldus puhvrisse on vajalik, valmistada veidi alla 1 liitri lahuse, kasutades õigeid koguseid mononaatriumfosfaati ja dinaatriumfosfaati.

4. Kontrollige pH-d

Kasutage pH-proovivõtturit, et veenduda puhvri õige pH saavutamiseni. Vajaduse korral reguleerige veidi, kasutades fosforhapet või naatriumhüdroksiidi (NaOH).

5. Parandage helitugevust

Kui soovitud pH on saavutatud, viia puhvermahu 1 liitrini. Seejärel lahjendage soovitud puhvrit. Seda sama puhvrit saab lahjendada puhvrite tekitamiseks 0,5 M, 0,1 M, 0,05 M või vahepeal.

6. Näpunäited puhvri jaoks

Pidage meeles, et pKa mõõdetakse täpselt täpselt. Erinevatest allikatest pärit kirjanduses võivad olla erinevad väärtused.

7. Mida sa vajad

Puhverdamiseks vajate kolme ainet, ülejäänud materjalid on varustus. Need ained on pH-taseme reguleerimiseks mononaatriumvesinikfosfaat, dinaatriumfosfaat ja fosforhape või naatriumhüdroksiid.

Teil on vaja ka pH-meetrit ja sondi ning sobivaid laboriseadmeid. See hõlmab mõõtekolvi, gradueeritud silindreid, keeduklaase ja segistiid.

Lõpuks vajate ka segamisplaati.