RNA eraldamiseks kasutatakse naatriumtsitraatpuhvrit, kuna see vähendab RNA kiudude baasi hüdrolüüsi. See muudab selle oluliseks sammu mRNA puhastamisel genoomi uurimisel või transkriptsiooni uurimisel.
Tsitraadipõhised puhvrid võivad samuti aidata kindlaks teha antigeene püsikoos preparaatides, kuna need purustavad antigeenide ja fikseerimiskeskkonna vahel tekkinud ristsidemed.
Järgneva juhendiga tehke naatriumtsitraatpuhver pH 6-ga. Juhised pole mitte ainult lihtsad, vaid ka kiireid. Nende sammude lõpuleviimiseks peaksite võtma ainult umbes 10 minutit.
Puhverdamiseks on kaks võimalust
Naatriumtsitraatpuhvri valmistamisel on kaks võimalust. Kõigepealt määrake, kas teil on nii sidrunhape kui ka konjugaadi alus, naatriumtsitraat. Kui teil on ainult sidrunhape, pole see probleem. Te võite ikkagi puhvrit teha.
Teisest küljest, kui teil on nii hape kui alus, siis looge iga põhilahus. Segage 21 grammi sidrunhapet 1 liitri destilleeritud veega ja 29,4 grammi naatriumtsitraati 1-liitrises destilleeritud vees.
Kui teil on ainult sidrunhape, segage 2,1 grammi alla 1 liitri destilleeritud veega ja jätkake järgmisel etapil.
Sidrunhappe ja naatriumtsitraadi lahuste segamine
Nüüd, kui olete loonud oma põhilahuse (kui teil on nii hape kui ka alus) või segage hape destilleeritud vees (kui te seda ei teinud), saate oma lahendusi keskenduda.
Segage 82 milliliitrit sidrunhappe lahust 18 milliliitri naatriumtsitraadi lahusega.
Seejärel segule kogumaht kuni destilleeritud veega alla 1 liitri. Jätke järgmises etapis naatriumhüdroksiidi (NaOH) lisamiseks piisavalt ruumi.
PH reguleerimine
Kui lahust segatakse õrnalt magnetsegajaga, kasutage 1 M naatriumhüdroksiidi, et segu pH oleks reguleeritud 6,0-ni. Seejärel tehke lahuse lõppmaht destilleeritud veega, kasutades mõõtekolvi, kuni 1 liitrini.
Mida peate puhvri tegema
Nii naatriumtsitraatpuhvri valmistamiseks pole ka mitte kaua aega võtta, ei vaja ka seda ka palju materjale. Sidrunhappega, 1 M naatriumhüdroksiidiga, destilleeritud veega ja kalibreeritud pH-proovivõtturiga, jääte sind pooleks. Naatriumtsitraadi kasutamine on vabatahtlik.
Puhverdamise jaoks on vaja ka 1-liitrine gradueeritud silinder, 1-liitrine mõõtekolp ja kolm 1-liitrist meediumipudelit. Lõpuks vajate magnetsegurit ja magnetsegurit.
Kui teil pole neid kõiki materjale, kaaluge oma kooli või töökoha labori kasutamist, nii et te ei pea ise neid ostma. Samuti saate neid materjale kergesti osta veebis või külastada oma piirkonnas spetsiaalset kauplust.