Külmkuivatatud kultuuride põhialused (lüofiliseerimine)
Lüofiliseerimine, mida tuntakse ka kui külmkuivatamist, on protsess, mida kasutatakse bioloogilise materjali säilitamiseks proovi vee eemaldamise teel, mis hõlmab proovi esimest külmutamist ja seejärel kuivatamist vaakumis väga madalatel temperatuuridel. Lüofiliseeritud proove võib ladustada palju kauem kui töötlemata proovid.
Miks kasutatakse lüofiliseerimist
Bakterikultuuride lüofiliseerimine või külmkuivatamine stabiliseerib kultuure pikaajaliseks säilitamiseks, vähendades samal ajal proovi rangelt kuivatamist põhjustavaid kahjustusi.
Paljud mikroorganismid säilivad hästi, kui need on lüofiliseeritud ja neid saab kergesti rehüdraatida ja kasvatada kultuurisöötmes pärast pikaajalist ladustamist.
Lüofiliseerimist kasutatakse ka biotehnoloogia ja biomeditsiini tööstuses, et säilitada vaktsiine, vereproove, puhastatud valke ja muud bioloogilist materjali.
Seda lühikest laboratoorset protseduuri saab kasutada kõigi kaubanduslikult kättesaadavate külmutuskuivatitega, et säilitada oma kultuurikogusid.
Lüofiliseerimisprotsess
Lüofiliseerimise protsess on tegelikult füüsilise nähtuse, mida nimetatakse sublimatsiooniks, rakendamine: aine üleminek tahkest gaasilisest olekus ilma vedelfaasi läbimata. Lüofiliseerimise ajal eemaldatakse külmutatud proovis olev vesi veevaba auruna, ilma et proov oleks esimest korda sulatatud.
Sagedased vigu
Lüofiliseerimisel on üks levinumaid vigu, kuna ei ole teada proovi sulamistemperatuuri, mistõttu on raske õige lüofilisaatori valida.
Teie proovid võivad protsessi käigus sulada. Veel üks levinud viga on külmkambris külmküpsetamine riiulil külmkuivatil. Esmase kuivatamise ajal peaksite hoidma riiuli temperatuuri veidi proovivõtu eutektilise temperatuuri all. Proovide molekulide julgustamiseks peaks liikuma vaid piisavalt kuumust, kuid vältida sulamist.
Kolmas viga on teie proovide jaoks vale seadme kasutamine. Kuna külmutuskuivatid on kasutusel rühma seadetes, peaksite enne selle ostmist teadma järgmist:
- Kui palju niiskust lüofiliseeritakse
- Mida proov (ja eutektiline temperatuur)
- Kuidas külmutuskuivati korralikult kasutada?
Kui seadet ei kasutata õigesti, võib see kõik proovid rikkuda. Mis toob meid teise üldise viga: vaakumpumba hoidmine. Pump peab olema suurepärases töökorras, et lüofiliseerimine toimiks. Pumba käitamine gaasiballastiga 30 minutit enne ja pärast külmkuivatamist suurendab pumba tööiga. Gaasiballaadi avamine puhastab saasteaineid pumba sisse, vältimaks sisemiste komponentide kahjustamist. Palun kontrollige sageli värvimuutuse ja osakestega pumba õli ja vajadusel muutke õli. Regulaarsed õlivahetused hoiavad pumpit külmkuivatamise käigus optimaalset vaakumit.
Lõpuks võib teie lüofiliseerimisprotsessi jaoks olla vale külmkuivatamise lisavarustus ka suur viga. Kas vajate oma vaakumi all korgiproovi? Siis on vaja peatumiskambrit. Kas külmkuivatatakse kolbides? Seejärel kindlustage sademete kuivatuskamber.
Kõrvaldades eespool nimetatud vigu, saate oma külmutuskuivati ja -pumbaga paremat hoolt pakkuda ning proovide võtmine külmkuivatamise ajal on parem.
Viited
Labconco Uudised. "Viimased 5 vigu lüofiliseerimisprotsessis." http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes